primier5缺少文件
Primer的主要功能分四大块,其中有三种功能比较常用,即引物设计(primer),限制酶切点分析(Enzyme),基元查找(Motif)。另外功能是同源性分析(Allign),并非premier的特长,在此略过。该软件还有别的一些功能,如序列“朗读”,DNA与蛋白序列的互换(Protein),发声提示键盘输入等,但是其中最优秀的缺失能设计简并引物。
使用步骤:
Premier软件的启动并打开一段序列后,界面如下:
其主要功能在主届面上一目了然(按钮功能如上述)。限制酶切点分析以及基元查找比较简单,点击该功能按钮后,选择相应的限制酶或基元,按确定即可。常见的限制酶和基元一般都可以找到。还可以编辑或者添加限制酶或者基元。
进行引物设计是,点击“Primer”按钮,界面如下:
进一步点击“search”按钮如图2,出现search criteria窗口,有多种参数以调整。搜索目的(Seach For)有三种选项,PCR引物(PCR Primers),测序引物(Sequencing Primers),杂交探针(Hybridization Probes)。搜索类型(Search Type)可选择上、下游引物(Sens/Anti-sense Primer)都分别查找)(Both),或者成对查找(Pairs),或者分别以适合上下有引物为主(Compatible With Sense/Anti-sense Primer)。另外还可以改变选择区域(Search Ranges),引物长度(primer length),选择方式(search mode,)参数选择(search parameters)等等。研究人员可根据自己的需要设定各项参数。如果没有特殊要求,建议使用默认设置。然后按“OK”,随之出现的search progress窗口中显示的search completed时,再按“OK”。